Αλυσιδωτή αντίδραση της Πολυμεράσης P.C.R Polymerase Chain Reaction

0

Θεόδωρος Ι  Μπαβεας                                            Real Time test 

Η μοριακή εξέταση P.C.R ακούγετε  πολλές  φορές ως  μια  εξέταση, ή  αναφέρετε  ή  και  γράφετε  ως  ένα  μηχάνημά  απαραίτητο  για  τον έλεγχο και  τη  διάγνωση του   Κορωνοιού ….αυτή  τη  περίοδο  της  πανδημίας Θεωρώ ότι πρέπει  να  γνωρίζουμε με εκλαϊκευμένη  ενημέρωση ότι αυτή η μοριακή  εξέταση είναι από τις πιο  σημαντικές επαναστατικές εξετάσεις  της  Μοριακής  Βιολογίας και αποτελεί  τη σπουδαία ανακάλυψη του  20 αιώνα ,της  οποία  ο ερευνητής  και  οι  συνεργάτες  του  πήραν  το  Βραβείο  Νόμπελ Είναι η  εξέταση  η  οποία έχει αλλάξει  εκ βαθέων την μελέτη  του γενετικού υλικού ,το  γονιδίωμα κάθε οργανισμού  και καθιέρωσε τη μοριακή  βιολογία σημαντικό εργαλείο  στην ερευνητική εργαστηριακή  διαγνωστική και μελέτη  της  ιατρικής για  την  υγεία των  πολιτών  και  κυρίως κατά  των  λοιμωδών  μολυσματικών  λοιμώξεων Η σπουδαία  σημασία και το πλεονέκτημα  αυτής  της  εξέτασης  είναι  ότι μπορεί  να εφαρμοστεί για τον έλεγχο σε κάθε βιολογικό υλικό στην ιατρική ,στη γυναικολογία,την ιατροδικαστική όπως σε βιοψίες ιστών ,αίμα ,σπέρμα σάλιο ,έκκριμα ,τρίχες ακόμη και στη καταγραφή των νεοπλασματικών μεταλλάξεων στα γονίδια διότι μπορεί  να  ανιχνεύσει διαταραχές  στα  γονίδια κάνοντας πρώιμη διάγνωση ορισμένων μορφών καρκίνου H μεθοδολογία αυτή είναι μια εξαιρετικά ευαίσθητη αξιόλογη μέθοδος η οποία γίνεται σε Μοριακό  αναλυτή,διαφόρων μεγεθών και εκτελέσεως μικρού ή μεγάλου αριθμού  εξετάσεων  Είναι εξέταση απλή και πολύ ακριβής μέθοδος πολλαπλασιασμού  του γενετικού  υλικού ενός  οργανισμού  και επιτυγχάνεται αυτό  με  τη  βοήθεια  ενός  ενζύμου της  Πολυμεράσης  Με  αυτή  την εξέταση και  ένα μόριο  από  το D,N.A ενός οργανισμού μπορεί  να πολλαπλασιασθεί σε  σύντομο  χρονικό  διάστημα εκατομμύρια φορές  Επίσης εφαρμόζεται πολύ  συχνά και  στο προγεννητικό έλεγχο ελέγχοντας  διάφορες  γονιδιακές γενετικές ανωμαλίες   Αυτό  γίνεται σε  δείγμα αμνιακού υγρού ,εμβρυϊκού  αίματος,  ή χοριακων  λαχνών                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                          

Η ταχεία αυτή μέθοδος χρησιμοποιεί για το προγεννητικό  έλεγχο τη  Φθορίζουσα αντίδραση  της Πολυμεράσης QT- P.C.R Quantitative Fluorescent Polymerase -P.CR  Με αυτό το τρόπο διαπιστώνεται πριν από  το προγεννητικό μοριακό  καρυότυπο  εάν υπάρχει γενετική ανωμαλία όπως θρομβοφιλική διάθεση ,μεσογειακή  αναιμία  αιμοσφαιρινοπαθεια  κυστική ινωση,  ασφαλώς στοιχεία  που  αφορούν  τους  ειδικούς επιστήμονες για τον περαιτέρω έλεγχο Τέλος η χρήση αυτής εξέτασης P.C.R επικεντρώθηκε αρχικά στη  διάγνωση  σε πολλές  ιογενής  λοιμώξεις όπως και σε  σεξουαλικά  μεταδιδόμενα  νόσημα AIDS ,Ηπατίτιδες Β , C ιός  θηλωμάτων γεννητικών οργάνων H.P.V ως αιτιολογικός παράγων για το καρκίνο της μήτρας ,για τον απλό  έρπη  ,το μεγαλοκυτταριο και το μυκοβακτηριδιο  της  Φυματίωσης .κ.α

Τέλος  είναι  ειδική εξέταση διότι με  πολύ  ακρίβεια  εντοπίζει το κορονοιο με πρόδρομα συμπτώματα  σε  άρρωστους  ενώ  δεν  εντοπίζει τον Ίο  στο  στάδιο  της επώασης                                                                                                                                                                                                                                                      Όμως σε ασυμπτωματικούς  ασθενείς  η ευαισθησία  και η ακρίβεια της εξέτασις  είναι  άνω του 90%Με την εξέταση  αυτή η απομόνωση και οι δυσκολίες στις καλλιέργειες των ίων ξεπεράστηκαν και  διότι δεν είχαν αξιόλογα  αποτελέσματα και  χρειαζόταν πολύ  χρόνος για το  αποτέλεσμα  

Ακόμη  αυτή  η  εξέταση  αποτελεί  την εξέταση επιβεβαίωσης σε  άλλες εργαστηριακές  διαγνωστικές  εξετάσεις όπως με την ανοσοενzυματικη μέθοδο ELISA σε  διάφορα νόσημα ώστε να  μπει η τελική  διάγνωση με απόλυτη  βεβαιότητα  Επομένως η Αλυσιδωτή  αντίδραση της Πολυμεράσης  είναι μοναδική και καταλληλότερη μέθοδος για  τη διάγνωση του Κορονιού COVID 19 Ενώ η ανίχνευση των αντισωμάτων     IgM IgE πρέπει να έχουν περάσει 7-14 ημέρες  από τη μόλυνση και  γίνεται με  άλλη μέθοδο ώστε  να  αποτελεί βοηθητικό διαγνωστικό  στοιχείο   Επίσης  με αυτή την  εξέταση εντοπίζουμε γενετικό υλικό κάποιου παθογόνου μικροοργανισμού , Επίσης με  την εξέταση αυτή  σε  κάποια  παθολογική  κατάσταση μπορούμε να  εντοπίσουμε γενετικό  υλικό του  παθογόνου  αιτίουΤέλος  με  τη  P.C.R μπορούμε να εντοπίσουμε  γενετικές μεταλλάξεις στα  ανθρώπινα  γονίδια οι οποίες σχετίζονται με τη καρκινογένεση   και τις  κληρονομικές ασθένειες Πάντα  με  εντυπωσίαζε  η Μοριακή βιολογία  και η γενετική αλλά τα  χρόνια  περάσαν  και  δεν ξαναγυρίζουν  πια …αλλά  καλό  είναι  το  γηράσκω αεί  διδασκόμενος 

Γνώρισα  στη  δύση  της  ιατρικής  μου  ζωής τον Μοριακό  αναλυτή στο   Διαγνωστικό εργαστήριο  Λήμνου  όπου κάναμε  P.C,R  εξέταση  με  ακρίβεια αποτελέσματος  95% για τη  διάγνωση της  Γρίπης  Α και  Β.. 

Η αξιοπιστία της μεθόδου PCR και για  τον Κορονοιό είναι 99 % αποτελεσματική                                                                                                                                          Η ευαισθησία  αυτής της  μεθοδολογίας έναντι  των παλαιοτέρων μεθόδων Άνοσο χρωματογραφίας η οποία γινότανε μέχρι πρότινος  η ευαισθησία των οποίων  ήταν μεταξύ  50-80% γίνεται ευκαιριακά  και  σήμερα ως  ταχεία  εξέταση για  το COVID19 δεν παρέχει όμως ασφάλεια  αποτελέσματος Επομένως σήμερα  εάν  είναι άρρωστα 100 άτομα ….από Γρίπη Α- Β και κορονοιό τότε εάν αυτά όλα τα  άτομα εξεταστούν θα ανιχνευτούν άρρωστα με τη μέθοδο μέσω του αναλυτή τηςΜοριακής τεχνολογίας Τέλος η  μεθοδολογία  P C R  αποτελεί  ασφαλές  και σύγχρονο διάφορο – διαγνωστικό εργαλείο  για  τον  θεράποντα ιατρό   για  την γρήγορη θεραπευτική  αγωγή  στον άρρωστο……και  την ταχεία  ανάρρωση  του   

Ιούλιος  2020